一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为性显微玻片标本!取材应根据要求选取材料来源及部位。例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖,细胞分裂快又便于切取;猪的肝小叶边界清晰明确;耳蜗以豚鼠的内耳易于定位和剥离!材料必须新鲜,搁置时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织活体时的形态结构。固定用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料...
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2021-12-19
如果透明时间过短,则透明不,石蜡难于浸入组织;透明时间过长,则组织硬化变脆,就不易切出完整切片,长为数小时!浸蜡与包埋用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织而起支持作用!通常先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1~2小时,再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍3小时左右,浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右的温箱中进行,以利石蜡浸入组织内!浸蜡后的组织材料块放在装有蜡液的容器中(摆好在蜡中的位置)...
切片刀的锐利与否、蜡块硬度是否适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度!通常切片厚度为4~7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上.贴片与烤片用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上,以免在以后的脱蜡、水化及染色等步骤中二者滑脱开.粘附剂是蛋白!首先在洁净的载玻片上涂抹薄层蛋白,再将一定长度蜡带(连续切片)或用刀片断开成单个蜡片于温水(45℃左右)中展平后,捞至玻片上铺...
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2021-12-19
切片脱蜡及水化干燥后的切片需脱蜡及水化才能在水溶性染液中进行染色.用二甲苯脱蜡,再逐级经纯酒精及梯度酒精直至蒸馏水.如果染料配制于酒精中,则将切片移至与酒精近似浓度时,即可染色.染色石蜡切片染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察!未经染色的细胞组织其折光率相似,不易辨认!经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型的细胞组织!染色剂种类繁多,应根据观察要求及研究内容采...
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2021-12-19
正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陆环等也可做脱水剂!透明纯酒精不能与石蜡相溶,还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液,替换出组织内的酒精!材料块在这类媒浸液中浸渍,出现透明状态,此液即称透明剂,透明剂浸渍过程称透明.常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等,各种透明剂均是石蜡的溶剂!通常组织先经纯酒精和透明剂各半的混合液浸渍1~2小时,再转入纯透明剂中浸渍.透明剂的浸渍时间则要根据组织材料块大小及属于囊腔...
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2021-12-19
固定能使组织硬化,有利于切片的进行,而且也有媒浸作用,有利于组织着色。固定液的种类很多,其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同。例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪,甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素!固定液可分为单一固定液及混合固定液。前者有甲醛(乙醛、福尔马林)、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、(四氧化锇)、重铬酸钾及苦味酸等,单一固定液不能固定细胞中的所有成分;混...