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　　切片刀的锐利与否、蜡块硬度是否适当都直接影响切片质量，可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度！通常切片厚度为4～7微米，切出一片接一片的蜡带，用毛笔轻托轻放在纸上!贴片与烤片用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上，以免在以后的脱蜡、水化及染色等步骤中二者滑脱开。粘附剂是蛋白.首先在洁净的载玻片上涂抹薄层蛋白，再将一定长度蜡带（连续切片）或用刀片断开成单个蜡片于温水（45℃左右）中展平后，捞至玻片上铺正，或直接滴两滴蒸馏水于载玻片上，再把蜡片放于水滴上，略加温使蜡片铺展，最后用滤纸吸除多余水分，将载玻片放入45℃温箱中干燥，也可在37℃温箱中干燥，但需适当延长时间!

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　　正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陆环等也可做脱水剂!透明纯酒精不能与石蜡相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液，替换出组织内的酒精。材料块在这类媒浸液中浸渍，出现透明状态，此液即称透明剂，透明剂浸渍过程称透明!常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等，各种透明剂均是石蜡的溶剂！通常组织先经纯酒精和透明剂各半的混合液浸渍1～2小时，再转入纯透明剂中浸渍！透明剂的浸渍时间则要根据组织材料块大小及属于囊腔抑或实质器官而定.

　　固定能使组织硬化，有利于切片的进行，而且也有媒浸作用，有利于组织着色。固定液的种类很多，其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同。例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪，甲醛能固定一般组织，但溶解肝糖和色素!固定液可分为单一固定液及混合固定液.前者有甲醛（乙醛、福尔马林）、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、（四氧化锇）、重铬酸钾及苦味酸等，单一固定液不能固定细胞中的所有成分；混合固定液可以互补不足，常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液（配方见有关技术书籍）！

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　　教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的！活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。基本技术编辑播报说明石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。

　　有些细胞组织经浸润后，可使溶液中银离子还原成金属银或银粒附着在细胞组织上，呈棕黑色，这种性质称亲银性，而有些细胞组织本身不能子还原成金属银，还需加还原剂才能将银离子还原，称嗜银性.洗涤与脱水固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，否则会影响后期的染色效果。该步骤称作洗涤多数用流水冲洗；使用含有苦味酸的固定液固定的则需用酒精多次浸洗；使用酒精或酒精混合液固定的组织，则不必洗涤，可直接进行脱水.

　　因此，应根据所要显示的内容来选择适宜的固定液。10%福尔马林（4%甲醛）或10%磷酸缓冲福尔马林是病理切片常规使用的固定液，不仅适用于常规苏木精-伊红（HE）染色，还可以用于组织学有关的其他技术的切片染色。固定液的用量通常为材料块的20倍左右，固定时间则根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以从1小时至数天，通常为1小时至24小时.切片包埋好的蜡块用刀片修成规整的四棱台，以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上，夹在轮转式切片机的蜡块钳内，使蜡块切面与切片刀刃平行，旋紧！

　　切片脱蜡及水化干燥后的切片需脱蜡及水化才能在水溶性染液中进行染色.用二甲苯脱蜡，再逐级经纯酒精及梯度酒精直至蒸馏水。如果染料配制于酒精中，则将切片移至与酒精近似浓度时，即可染色.染色石蜡切片染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察！未经染色的细胞组织其折光率相似，不易辨认.经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型的细胞组织!染色剂种类繁多，应根据观察要求及研究内容采用不同的染色剂及染色方法，还要注意选用适宜的固定剂才能取得满意的结果。

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