武汉流式细胞凋亡检测蛋白_上海annexin v-fitc细胞凋亡检测试剂盒_深圳市安培生物科技有限公司
注：加入的细胞培养液一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞，另一方面细胞培养液中的血清可以有效抑制或中和残留的胰酶；残留的胰酶会消化并降解后续加入的AnnexinV-FITC导致染色失败!4）用1ml4℃预冷PBS轻轻重悬细胞并计数，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清!5）再加入1ml4℃预冷的PBS重悬细胞，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清！用去离子水按1：4稀释BindingBuffer（4mlBindingBuffer+12ml去离子水）；用250ul结合缓冲液重新悬浮细胞，调节其浓度为1×106/ml；取100ul的细胞悬液于5ml流式管中，加入5ulAnnexinV-FITC，轻轻混匀；室温(20-25℃)避光孵育10min；上机前5min加入10ul碘化丙啶溶液，轻轻混匀；上机前在反应管中补加400ulPBS重悬细胞，避光保存，随即进行流式细胞仪（FACS）检测，AnnexinV-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光!
AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒包装规格产品货号：An0020、An0050、An0100规格：20T、50T、100T储存条件4ºC保存，一年有效产品介绍：磷脂酰丝氨酸（PS）是一种带负电荷的磷脂，正常细胞中，PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜PS由脂膜内侧翻向细胞膜外侧，使PS暴露在细胞膜外表面!AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
微量试剂需离心数秒将试剂收集至管底后再开盖取用。PropidiumIodide（PI）有毒，操作时要带手套，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触!AnnexinV-FITC中含有剧毒成分叠氮化钠（NaN3）,操作时要带手套，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。本试剂盒用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1x106!染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加!AnnixinV检测凋亡细胞的方法适用于悬浮生长的细胞，如：淋巴细胞等细胞的检测！
2）用1ml4℃预冷PBS轻轻重悬细胞并计数，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清！3）再加入1ml4℃预冷的PBS重悬细胞，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清！b)贴壁细胞：1）吸出细胞培养液至离心管中，PBS洗涤贴壁细胞一次，加入适量不含EDTA的胰酶细胞消化液消化细胞！2）室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶细胞消化液！需避免胰酶的过度消化.3）加入以上步骤中收集的细胞培养液，稍混匀，转移到离心管内，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清.
试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C所需实验器材：微量移液器；PBS；不含EDTA的胰酶消化液；低速离心机；流式细胞仪注意事项：此试剂盒仅供研究使用！
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因此AnnexinV被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒将AnnexinV进行绿色荧光（FITC）标记，以标记了的AnnexinV作为探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生.碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和坏死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红！
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因此采用AnnexinV与PI双染的方法，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来.试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C操作说明：细胞样品的准备：a)悬浮细胞：1）收集细胞至离心管中1000-2000rpm离心5min，小心去除上清! 种苗木不用土，用雨水作灌溉，废弃菇渣作花木培养基……昨天当记者来到位于德清县莫干山镇高峰村的浙江德清绿色阳光农业生态有限公司时，3000多盆常青藤正准备发往上海世博会，这些产自德清的绿色植物将在世博会期间扮靓室内展馆。 “前后将有十多万盆发往上海，主要是一些室外室内的绿色植物，有红叶石楠、金森女贞，金叶大花六道木等，由于我们生产的是容器苗木，一到上海就可以成活生长。”公司助理总经理陈伟正告诉记者，容器苗木的培育从播种、育苗、起苗到运输都被置放在容器中，直到要用于园林景观工程中才挖穴移栽到地里。“‘化整为零’的容器苗与传统的苗木生产方式相比，更便于集约化管理和机械化作业。由于具有根系发达、移栽成活率高、株型完整、不受季节限制、便于运输等优点，目前容器苗在园林绿化工程中已开始大量使用。”