北京肿瘤细胞凋亡检测试剂盒说明书_郑州组织细胞凋亡检测试剂盒说明书_深圳市安培生物科技有限公司

　　AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒包装规格产品货号：An0020、An0050、An0100规格：20T、50T、100T储存条件4ºC保存，一年有效产品介绍：磷脂酰丝氨酸（PS）是一种带负电荷的磷脂，正常细胞中，PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜PS由脂膜内侧翻向细胞膜外侧，使PS暴露在细胞膜外表面。AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合.

　　因此AnnexinV被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一！AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒将AnnexinV进行绿色荧光（FITC）标记，以标记了的AnnexinV作为探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生.碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和坏死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红！

　　试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C所需实验器材：微量移液器；PBS；不含EDTA的胰酶消化液；低速离心机；流式细胞仪注意事项：此试剂盒仅供研究使用.

　　因此采用AnnexinV与PI双染的方法，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C操作说明：细胞样品的准备：a)悬浮细胞：1）收集细胞至离心管中1000-2000rpm离心5min，小心去除上清!

北京肿瘤细胞凋亡检测试剂盒说明书

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　　对于贴壁生长的细胞，由于在胰酶等消化处理过程中会造成细胞膜的损伤，会造成较高的假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测，可将胰酶消化后的细胞保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤.尽管目前，包括国外也有一些单位采用该方法检测贴壁生长的细胞！我不推荐用该方法检测。因为其重复性较差，且需要操作时非常小心.消化贴壁细胞残留的胰酶会消化并降解AnnexinV-FITC，终导致染色失败！细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。　　l培养：将灌装制品按不同批号区分，同一批号不同板层的灌装制品也需分开放置（小批号样品一半正立放置、一半倒立放置），装入中转筐中，先置20-25℃培养7天，进行目检，将正立转成倒立，将倒立转成正立，将再置30-35℃培养7天；记录培养的起止时间，且灌装制品培养期间每两个小时至少记录一次培养温度至制品结束培养。在房间培养培养基样品，房间四个角和中央处均放置一个温度计，到达记录时间点后记录同一个房间内每个温度计显示的温度。将样品的培养观察结果记录试验批样品培养观察记录”中。